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養(yǎng)好細(xì)胞注意點(diǎn)(一)

更新時間:2017-03-10      點(diǎn)擊次數(shù):3639

(一)冷凍管應(yīng)如何解凍 

 

取出冷凍管后,須立即放入 37 ℃ 水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管的爆裂。

 

(二)細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,DMSO如何處理

 

在細(xì)胞解凍之后,可直接離心去除DMSO,用新鮮的培養(yǎng)基懸浮后直接放入含有 新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),如此可避免解凍后細(xì)胞生長受到DMSO影響。

 

(三)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基

 

每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活,不應(yīng)該馬上替換。

 

(四)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的血清種類

 

 血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。

 

(五)何謂 FBS,F(xiàn)CS,CS,HS

 

FBS (fetal bovine serum) 和 FCS (fetal calf serum) 是相同的意思,兩者都是指胎牛血清。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。

 

(六)培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用 5% 或 10% CO2

 

一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為 pH 的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中 NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的 CO2 濃度。理論當(dāng)培養(yǎng)基中 NaHCO3 含量為每公升 3.7 g 時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用 10% CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中 NaHCO3 為每公升 1.5 g 時,則應(yīng)使用 5% CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。

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